人工栽培苍术的含量测定

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    点击次数:2165 更新时间:2020年01月02日14:23:59 打印此页 关闭

    人工栽培技术的应用是解决市场上苍术窘境的有效途径,但是,仿野生品的质量有待于借助实验手段予以评价。本实验依据2015版《中国药典》,以连锁药店市售的苍术饮片为衡量标尺,以指标性成分为标准,对人工栽培的苍术进行鉴别和含量测定,客观地评价栽培苍术的质量,以期反映栽培技术的效果,为更合理开发中草药资源,更合理控制中草药市场提供实验依据。

    1  实验材料仪器:Waters E2695高效液相色谱仪(美国沃特世科技有限公司)、手动中药切片机(温岭市林大机械有限公司)、MDF-492超低温冰箱(日本三洋公司)、高速多功能粉碎机(永康市敏业工贸有限公司)、PALL水纯化系统(Pall Corporation公司)、ML203T/02十万级电子天平(梅特勒--托利多)。试剂:甲醇(色谱级)、石油醚(60~90℃)和丙酮(分析纯)。实验样品:栽培品标记为CZ;随机选购苍术饮片,分别标记为CZ1、CZ2、CZ3,对照品为苍术素,采购于中国食品药品检定研究院。

    2  实验方法2.1 待测溶液TLC对照溶液:0.2mg·m L-1苍术素甲醇溶液,TLC样品溶液:以生药量计,为0.08g·m L-1甲醇溶液。HPLC对照溶液:0.2μg·m L-1苍术素甲醇溶液,HPLC样品溶液:以生药量计,为0.004g·m L-1甲醇溶液。2.2 TLC鉴别照《薄层色谱法检验标准操作程序》(附录ⅥB)试验,吸取供试品溶液6μL与对照品溶液2μL,将供试品溶液与对照品溶液分别通过毛细管点于同一个硅胶G薄层板上,采用石油醚(60~90℃)-丙酮(9:2)作为展开剂,展开,取出,晾干,往硅胶G薄层板上喷10%硫酸乙醇溶液,放入烘箱加热,直至斑点显色清晰后取出。观察薄层色谱板,在与对照品色谱同一高度的位置上,应显示相同颜色的斑点。2.3 HPLC含量测定2.3.1 色谱条件色谱柱:Diamonsil C18(2)(250×4.6mm,5μL);流动相:A:甲醇,C:水,按A:C=79:21;进样量:10μL;流速:1m L·min-1;检测波长:340nm。2.3.2 含量测定分别精密吸取HPLC样品溶液20μL,分别进样3次,按“2.3.1”项下色谱条件,分别测定,计算不同样品中苍术素的含量。

    3  实验结果3.1 TLC鉴别结果通过观察对比,发现在薄层板上有若干斑块,其中在

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    图1  各样品含量测定的HPLC色谱图

     

    与对照品溶液色谱对应的位置上,显墨绿色斑块,其中CZ1和CZ2斑块颜色较深,CZ比CZ3样品颜色深。3.2 含量测定结果经HPLC测定,CZ苍术素的含量为0.8366%,CZ1、CZ2、CZ3中苍术素的含量分别为1.1671%、0.7611%、0.7326%,均高于2015年版《中国药典》一部正文的规定(>0.30%),如图1所示。

    4  讨论表观鉴别常常通过观察外观、断面颜色、油室的数量、药材的气味等方式来判定北苍术的品质优劣,在本实验中,我们采用TLC以及HPLC方法,简要、客观地直接对人工栽培苍术进行评价,方法简洁,适用于基层食药检测。通过TLC法的鉴定与HPLC法检测,我们发现,不同的来源,北苍术中苍术素的含量也是不同的,表明生态环境或者炮制方法是影响药材质量的因素,同时,向我们提示在今后的人工栽培过程中,需要注意调控土壤、光照、水分、施肥及防虫治虫等影响这类经济农作物质量的因素,以实现增产保量的目的。

    5  结语本实验中,人工栽培苍术含有指标性成分,与市售同类饮片相比,苍术素的含量居中,且高于法定药品标准的规定,提示苍术栽培品具有市场竞争力,人工栽培技术可拟被推广。

     

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